KBFI KB laboris kasutatav kõrglahutusega respiromeetria on kaasaegne oksügraafia meetod, mille abil mõõdetakse väga täpselt hapniku tarbimise kiirust proovides, mis peegeldab otseselt mitokondriaalset hapniku tarbimise kiirust ATP sünteesil hingamisahelas. Kasutades spetsiifilisi substraate ja inhibiitoreid on selle meetodiga võimalik määrata nii mitokondri intaktsus, kui ka selle eri funktsioonide, näiteks mitokondris olevate hingamisahela komplekside aktiivsus rakus.
Rakukultuurid – KB laboris on kogemus ja kompetents töötada kõigi inimese rakuliinidega. Laboris on laminaariülene hapnikukamber mis võimaldab katseid läbi viia erinevatel hapniku kontsentratsioonidel, näiteks kasvatada rakke püsivalt 5% hapnikutaseme juures, mida loetakse füsioksiaks ehk keskmiseks hapnikutasemeks kudedes.
Rakendades kõrglahutusega respiromeetria meetodit saab määrata lihase töövõime languse algpõhjused ning jälgida ravi efektiivsust. Lihasbiopsias määratakse rakkude üldine energiatootmise võimsus, mitokondri hingamisahela komplekside aktiivsus ja energiaülekande tüüp ning efektiivsus (kreatiin kinaasi ja adenülaat kinaasi raja aktiivsus). Metoodika on kasutatav ka loommudelil, rakukultuuridel, erinevate haiguste korral ja ravimiuuringutes.
Katsemudel – lihasbiopsia
Meetodid – kõrglahutusega respiromeetria
Laboris kasutusel oleva aparatuur võimaldab analüüsida ravimikandja liikumist soovitud piirkonda rakus nii fikseeritud kui ka elusrakkudes. Järgnevalt saab soovi korral läbi viia ka esmased funktsionaalsed uuringud ainete esmase mõju kohta.
Katsemudel – rakukultuurid, koeproov
Meetodid – kõrglahutusega respiromeetria, konfokaalmikroskoopia
Määratakse, ravimi või ravimikandja mõju rakkude (energia)ainevahetusele. Uuringute tulemused annavad kiire vastuse enne edasi liikumist suuremahulistesse uuringutesse.
Katsemudel – rakukultuurid, loommudel
Meetodid – kõrglahutusega respiromeetria, konfokaalmikroskoopia
Meie laboris on võimalik määrata nii rakkude elumust kui ka esmaseid väikseid funktsionaalseid muutusi raku energiaainevahetuses, mis eelnevad elumuse olulisele langusele.
Katsemudel – rakukultuurid
Meetodid – kõrglahutusega respiromeetria, konfokaalmikroskoopia
KB laboris on võimalik läbi viia põhjalik analüüs, millised muutused toimuvad rakkude energiaainevahetuses näiteks viibimisel ebasoodsas (saastunud) keskkonnas. Uuringuteks on võimalik kasutada nii loommudeleid kui ka proove looduskeskkonnast. Samuti saab mõõta saasteainete toimet vee-elustikule ning teha kindlaks, millised patoloogilised protsessid energiaainevahetuses on sellega seotud.
Katsemudelid – rakukultuurid, loommudel(kala)
Meetodid – kõrglahutusega respiromeetria, konfokaalmikroskoopia
Uuringutes on näidatud, et ekstratsellulaarsed vesiikulid sisaldavad muuhulgas erinevaid valke ja aminohapete fragmente, mis võivad mõjutada oluliselt retsipient-rakke. KB laboris kasutatavate meetoditega on võimalik kiire funktsionaalse uuringuga määrata ekstratsellulaarsete vesiikulite mõju rakkude ainevahetusele.
Katsemudelid – rakukultuurid, loommudel
Meetodid – kõrglahutusega respiromeetria, konfokaalmikroskoopia
Vere vormelementide energiametabolismi muutused kui patoloogiate indikaatorid.
Vererakkude ainevahetuse muutused peegeldavad paljudel juhtudel haiguste arengut organismis. KB laboris kasutusel oleva aparatuuriga on võimalik teha kiire esmane analüüs, kasutades vere vormelemente, näiteks trombotsüüte, et määrata muutused energiaainevahetuses, mis sõltuvad konkreetse haiguse kulust. Uuringute tulemused annavad kiire vastuse enne edasi liikumist suuremahulistesse uuringutesse.
Meetodid – kõrglahutusega respiromeetria
Küsimuste korral ja koostöösoovide arutamiseks palun pöörduda:
Kersti Tepp kersti.tepp@kbfi.ee
Tuuli Käämbre tuuli.kaambre@kbfi.ee